被檢雞腦脊髓炎活毒疫苗須符合下列條件:一、特性試驗:須具固有理學的性狀,且無異物及異常氣味,加所附稀釋液溶解後須濃度均一。
二、無菌試驗:不得含有任何可能檢出之活菌。
但屬胚胎蛋製造且以非注射方式(Non-Parenteral)免疫者,每劑量所含非病原菌不得超過一個。
三、真空試驗:於暗室距離五毫米以內以TeslarCoil行無極放電時,瓶內須有放電。
但填充氮或液態之製劑,不在此限。
四、含濕度試驗:含濕度須為四%以下。
但液態之製劑,不在此限。
五、安全試驗:選三至五週齡無特定病原(Specificpathogenfree,SPF)雞七隻,隨機取二隻為對照組,其餘五隻依疫苗用法各接種十劑量,接種後觀察三週,觀察期間均須無任何不良反應而健存。
六、病毒含有量試驗:依下列方法擇一試驗:(一)供試疫苗以十倍稀釋法稀釋成10-1至10-4後,以其一毫升腦內注射於一至四日齡SPF雛雞,每稀釋階段至少注射五隻,觀察三週,計算各稀釋階段呈運動失調之雛雞數,並以ReedandMuench法計算病毒含有量,每劑量須為103.0CID50(50%Chickinfectivedose)以上。
(二)供試疫苗以十倍稀釋法稀釋成10-1至10-4後,以其○.一毫升注射於六日齡SPF雞胚胎卵黃囊內,每稀釋階段至少注射五個,注射之雞胚胎經孵化至十八日齡,計算各稀釋階段呈異常之雞胚胎數,並以ReedandMuench法計算病毒含有量,每劑量須為102.5EID50(50%Embryoinfectivedose)以上。
另無接種之同日齡對照雞胚胎七十五%以上須無異常。
七、病毒迷入試驗:以未經稀釋之供試疫苗○‧一毫升與等量抗雞腦脊髓炎血清(中和指數二‧五以上之抗體價)中和後,注射於六日齡SPF雞胚胎卵黃囊內五個以上,經注射之雞胚胎於第十八日齡時檢查均須正常。
八、力價試驗:選三至五週齡SPF雞十二隻,隨機取二隻為對照組,其餘十隻依疫苗之用法用量各接種一劑量,經疫苗免疫後第三至四週採取血清,以雞腦脊髓炎病毒抗原行瓊膠沈澱反應(Agargelprecipitationtest),免疫組之血清須八十%以上呈陽性反應。
前項試驗確定困難時,應予複檢。
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